МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИАЦИНА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ГОСТ EN 15652-2015

Дата введения 1 января 2017 года

Цели, основные принципы и порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

1 ПОДГОТОВЛЕН Открытым акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации" на основе аутентичного перевода на русский язык европейского регионального стандарта, указанного в пункте 5 

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 29 мая 2015 г. N 77-П)

За принятие проголосовали:

	
		
		
		
	
	

		

			

			
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97     
			
			

			
Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97     
			
			

			
Сокращенное наименование национального органа по стандартизации     
			
		
		

			

			
Армения     
			
			

			
AM     
			
			

			
Минэкономики Республики Армения     
			
		
		

			

			
Беларусь     
			
			

			
BY     
			
			

			
Госстандарт Республики Беларусь     
			
		
		

			

			
Казахстан     
			
			

			
KZ     
			
			

			
Госстандарт Республики Казахстан     
			
		
		

			

			
Киргизия     
			
			

			
KG     
			
			

			
Кыргызстандарт     
			
		
		

			

			
Молдова     
			
			

			
MD     
			
			

			
Молдова-Стандарт     
			
		
		

			

			
Россия     
			
			

			
RU     
			
			

			
Росстандарт     
			
		
		

			

			
Таджикистан     
			
			

			
TJ     
			
			

			
Таджикстандарт     
			
		
		

			

			
Украина     
			
			

			
UA     
			
			

			
Минэкономразвития Украины     
			
		
	

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 21 июля 2015 г. N 950-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 15652-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 Настоящий стандарт идентичен европейскому региональному стандарту EN 15652:2009 Foodstuffs - Determination of niacin by HPLC (Продукты пищевые. Определение ниацина высокоэффективной жидкостной хроматографией).

Европейский региональный стандарт разработан техническим комитетом CEN/TC 275 "Анализ пищевых продуктов. Горизонтальные методы", секретариатом которого является DIN (Германия).

Перевод с немецкого языка (de).

Официальные экземпляры европейского регионального стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и европейского регионального стандарта, на который дана ссылка, имеются в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.

Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным европейским региональным стандартам приведены в дополнительном приложении ДА .

Степень соответствия - идентичная (IDT)

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания ниацина в пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) после гидролиза пробы, который может быть проведен тремя способами: кислотный гидролиз (A), ферментативный гидролиз (B) и последовательный кислотный и щелочной гидролиз (C).

Метод был валидирован при межлабораторных сравнительных испытаниях на обогащенных и не обогащенных пищевых продуктах, а именно пробах концентратов типа сухого завтрака - мюсли и мюсли с шоколадом, вареном окороке, зеленом горошке, лиофилизированном зеленом горошке с ветчиной, лиофилизированном супе, обогащенном апельсиновом соке, сухом молоке и пшеничной муке в диапазоне значений содержания ниацина от 0,5 до 24 мг/100 г. Дальнейшая информация приведена в Приложении B .

Способы A и B приводят к аналогичным результатам для ниацина. В этих случаях ниацин определяется как суммарное содержание никотинамида и никотиновой кислоты в пересчете на никотиновую кислоту [1] . Способ C приводит к более высоким значениям содержания ниацина в необогащенных злаках по сравнению со способами A и B, но в остальных пищевых продуктах дает сходные результаты. В способе C никотинамид превращается в никотиновую кислоту, и ниацин определяется в форме никотиновой кислоты [2] .

Способ A является более производительным и экономичным, нежели способы B и C.

Способ B применяется, если требуется раздельное количественное определение никотинамида и никотиновой кислоты. Способ A для этих целей непригоден, поскольку при кислотном гидролизе никотинамид в небольшой степени превращается в никотиновую кислоту.

В способе C определяют общее содержание ниацина. Щелочной гидролиз может вызвать высвобождение никотиновой кислоты из других производных, как правило, не являющихся биологически активными, что приводит к завышенным значениям содержания ниацина в таких пищевых продуктах, как кукуруза или злаки ([3] , [4] , [5] ).

Сравнение трех способов проведения гидролиза приведено в Приложении C .

Приведенные ниже ссылочные нормативные документы являются обязательными для применения настоящего стандарта. Для датированных ссылок применимо только цитируемое издание. В случае недатированных ссылок используют последнее издание документа, включая все изменения.

EN ISO 3696 Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (ISO 3696:1987 Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)

Витамеры ниацина извлекают из пищевых продуктов путем кислотного гидролиза (способ A), ферментативного гидролиза (способ B) или последовательного кислотного и щелочного гидролиза (способ C) и определяют методом ВЭЖХ с флуориметрическим детектированием в режиме послеколоночной дериватизации под действием ультрафиолетового излучения ([1] , [2] ). В способах A и B ниацин определяется как сумма содержаний никотинамида и никотиновой кислоты в пересчете на никотиновую кислоту после введение поправки на молекулярную массу. При щелочном гидролизе никотинамид полностью переходит в никотиновую кислоту.

4.1 Общие положения

При проведении анализа, если не оговорены другие условия, используют только реактивы установленной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696.

4.2 Требования к химическим реактивам и приготовление растворов

4.2.1 Ацетат натрия, массовая доля основного вещества w (C2 H3 NaO2 ) не менее 99%.

4.2.2 Гидрофосфат калия, массовая доля основного вещества w (K2 HPO4 ) не менее 99,5%.

4.2.3 Дигидрофосфат калия, массовая доля основного вещества w (KH2 PO4 ) не менее 99,5%.

4.2.4 Раствор пероксида водорода, нестабилизированный, массовая доля пероксида водорода w (H2 O2 ) = 30%.

4.2.5 Сульфат меди, массовая доля основного вещества w (CuSO4 ·5H2 O) не менее 99%.

4.2.6 Уксусная кислота, массовая доля основного вещества w (CH3 COOH) не менее 99,8%.

4.2.7 Концентрированная соляная кислота (для способов A и C), w (HCl) = 37,0%.

4.2.8 НАД+-гликогидролаза из Neurospora crassa (для способа B), активность 0,55 МЕ/мг белка.

Хранят при температуре ниже 0 °C.

Примечание - При межлабораторных сравнительных испытаниях была использована лиофилизированная НАД+-гликогидролаза (NADase), выделенная из Neurospora crassa, производства компании "Сигма", номер по каталогу N 9629, активностью от 0,5 до 3,0 МЕ/мг белка (биурет) <1>.

--------------------------------

<1> Эта информация приведена только для удобства пользователя настоящего стандарта и не означает поддержки данного продукта со стороны CEN. Допускается использование аналогичных продуктов, если доказано, что их использование приводит к аналогичному результату.

4.2.9 Раствор уксусной кислоты, молярная концентрация c (CH3 COOH) = 5 моль/дм3 .

4.2.10 Раствор ацетата натрия, молярная концентрация c (C2 H3 NaO2 ) = 2,5 моль/дм3 .