Toggle Dropdown
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН
Смеси для детского питания. Определение содержания нуклеотидов с помощью жидкостной хроматографии
СТ РК ISO 20638-2016
(ISO 20638:2015 Infant formula - Determination of nucleotides by liquid chromatography, IDT)
1 ПОДГОТОВЛЕН И ВНЕСЕН Товариществом с ограниченной ответственностью «Kazakhstan Business Solution» (Технический комитет по стандартизации ТК 91 «Химия»)
2 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Председателя Комитета технического регулирования и метрологии Министерства по инвестициям и развитию Республики Казахстан от № 296-од от 23 ноября 2016 года
3 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 20638:2015 Infant formula - Determination of nucleotides by liquid chromatography (Смеси для детского питания. Определение содержания нуклеотидов с помощью жидкостной хроматографии)
Международный стандарт разработан Техническим комитетом ISO/TC 34 «Пищевые продукты» совместно с ассоциацией AOAC INTERNATIONAL
Перевод с английского языка (en).
Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий национальный стандарт и на которые даны ссылки, имеется в Едином государственном фонде нормативных технических документов
Официальной версией является текст на государственном и русском языке
Степень соответствия - идентичная (IDT).
4 В настоящем стандарте реализованы нормы законов Республики Казахстан «О техническом регулировании» от 9 ноября 2004 года № 603-II, «О языках в Республике Казахстан» от 11 июля 1997 года № 151 -I
5 СРОК ПЕРВОЙ ПРОВЕРКИ 2023 год
ПЕРИОДИЧНОСТЬ ПРОВЕРКИ 5 лет
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен без разрешения Комитета технического регулирования и метрологии Министерства по инвестициям и развитию Республики Казахстан
Настоящий стандарт устанавливает метод количественного определения содержания 5'-мононуклеотидов в адаптированных или частично адаптированных начальных или последующих молочных смесях в твердых (т. е. порошки) или жидких (т. е. готовые к употреблению жидкости и жидкие концентраты) формах с помощью жидкостной хроматографии.
В настоящем стандарте применяются следующие термины с соответствующими определениями:
Адаптированные или частично адаптированные начальные или последующие молочные смеси (infant formula): Искусственный заменитель грудного молока, специально изготовленный для удовлетворения потребности младенцев в питании в течение первых месяцев жизни до использования соответствующего прикорма (согласно Стандарт Кодекса 72-1981 [1]).
Пробу растворяют в растворе с высоким содержанием соли для ингибирования взаимодействия белка и жира. 5'-мононуклеотиды - уридин-5'-монофосфат (UMP), инозин-5'-монофосфат (IMP), аденозин-5'-монофосфат (AMP), гуанозин-5'-монофосфат (GMP), и цитидин-5'-монофосфат (CMP) - выделяют из отобранной пробы путем твердофазной экстракции (SPE) с сильным анионообменным носителем с последующим хроматографическим исследованием с использованием С18 неподвижной фазы с градиентным элюированием, UV-детектированием и количественном анализом по внутренней стандартной методике с использованием тимидин-5'-монофосфата (TMP) [2].
Во время исследования, если не указано иное, используют реагенты известной аналитической степени чистоты и дистиллированную или деминерализованную воду, или воду эквивалентной степени чистоты.
4.1 Стандартные растворы со степенью чистоты не менее 99 % (Sigma1^ или эквивалент). Нуклеотидные соли натрия или гидраты солей натрия можно заменить, если формы свободной кислоты недоступны в продаже.
4.1.1 ТМР, тимидин-5'-монофосфат, CAS-номер: 365-07-1.
4.1.2 АМР, аденозин-5'-монофосфат, CAS-номер: 61-19-8.
4.1.3 СМР, цитидин-5'-монофосфат, CAS-номер: 63-37-6.
4.1.4 GМP, гуанозин-5'-монофосфат, CAS-номер: 85-32-5.
4.1.5 ШЕ, инозин-5'-монофосфат, CAS-номер: 131-99-7.
4.1.6 ЦМР, уридин-5'-монофосфат, CAS-номер: 58-97-9.
4.2 Бромистый калий (KBr).
4.3 Дигидрофосфат калия (KH2 PO4 ).
4.4 Ортофосфорная кислота (H3 PO4 ).
4.5 Гидроксид калия (KOH).
4.6 Этилендиаминтетрауксусная кислота, двуводная двунатриевая соль (EDTA).
4.7 Хлорид натрия (NaCl).
4.9 Приготовление реагентов
4.9.1 Буферный раствор (KH2 PO4 , c = 0,25 моль/л, pH = 3,5). Растворить 34,0 г KH2 PO4 (см. 4.3) в 900 мл воды и довести уровень рН ортофосфорной кислотой (см. 5.4) до 3,5. Разбавить до 1 л.
4.9.2 Экстрактный раствор (NaCl, c = 1 моль/л, EDTA c = 4 ммоль/л). Растворить 58,5 г NaCl (см. 5.7) и 1,5 г EDTA (см. 4.6). Развести в 1 л воды.
4.9.3 Отмывающий раствор (KBr, c = 0,3 моль/л). Растворить 3,6 г KBr (см. 4.2) в 100 мл воды.
4.9.4 Элюентный раствор (KH2 PO4 , c = 0,5 моль/л, pH = 3). Растворить 6,8 г KH2 PO4 (см. 4.3) в 90 мл воды и довести уровень рН ортофосфорной кислотой (см. 4.4) до 3,0. Развести до 100 мл.
4.9.5 Подвижная фаза A (KH2 PO4 , c = 10 ммоль/л, pH = 5,6). Растворить 1,4 г KH2 PO4 (см. 5.3) в 900 мл воды и довести уровень рН до (5,6 ± 0,1) с помощью раствора KOH (10 % м/об.). Развести водой до 1 л. Готовить ежедневно, так как при комнатной температуре часто происходит рост микробов в фосфатных буферах, которые содержат малое количество органического растворителя или совершенно его не содержат.
4.9.6 Подвижная фаза B, 100 %-ный метанол (см. 4.8).
4.10 Подготовка стандартных растворов
4.10.1 Исходные стандартные растворы, р приблизительно 1 мг/мл. Взять точную навеску 50 мг каждого 5'-монофосфатного нуклеотида в отдельные мерные колбы вместимостью 50 мл. Добавить 40 мл воды, перемешать до растворения и развести водой до нужного объема.
Международные
