МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ Единая система защиты от коррозии и старения МАСЛА И СМАЗКИ Методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию бактерий ГОСТ 9.082-77

Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 5 декабря 1977 г. N 2804 дата введения установлена 01.01.79

Ограничение срока действия снято Постановлением Госстандарта СССР от 22.10.90 N 2659

ИЗДАНИЕ с Изменением N 1, утвержденным в октябре 1990 г. (ИУС 1-91)

Настоящий стандарт распространяется на масла и смазки и устанавливает исследовательские лабораторные методы испытаний на стойкость к воздействию бактерий.

1.1. Сущность метода заключается в выдерживании образцов зараженных водной суспензией бактерий в условиях, оптимальных для развития бактерий, без дополнительного источника минерального и органического питания.

Метод применяют для определения бактериостойкости масел и смазок при отсутствии минеральных и органических загрязнений.

1.2. Отбор образцов

1.2.1. Масла и смазки отбирают по ГОСТ 2517-85  в количестве 10-15 г.

1.2.2. Образцами являются масла и смазки в соответствии поставки без специальной очистки и стерилизации.

1.2.3. Количество образцов должно быть не менее пяти.

1.2.4. Штаммы бактерий

1.2.4.1. Для испытаний применяют смесь штаммов чистых культур бактерий:

	

		

			
 
			
 
			
 
			
 
		
		

			
 
			

			
Bacillus subtilis
			
			

			
ВКМВ-1665Д,
			
			
 
		
		

			
 
			

			
Bacillus pumilus
			
			

			
ВКМВ-1664Д,
			
			
 
		
		

			
 
			

			
Bacillus stearothermophilus
			
			

			
ВКМВ-1668Д,
			
			
 
		
		

			
 
			

			
Bacillus coagulans
			
			

			
ВКМВ-1669Д.
			
			
 
		
	

1.2.4.2. Чистые культуры бактерий получают во Всесоюзной коллекции микроорганизмов института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, поддерживают периодическим пересевом и выращивают непосредственно перед испытаниями. Культуры бактерий обновляют один раз в год-два.

1.2.4-1.2.4.2. (Измененная редакция, Изм. N 1).

1.2.4.3. Пересев, выращивание и хранение культур бактерий проводят, как указано в приложении 1.

1.3. Аппаратура, материалы и реактивы - по ГОСТ 9.048-89 .

Масло МК-8 по ГОСТ 6457-66 .

Масло МС-8 рк по ОСТ 38.01387-85.

Масло МС-8 п по ОСТ 38.101163-78.

 (Измененная редакция, Изм. N 1).

1.4.1. Посуду и материалы готовят по ГОСТ 9.048-89 .

1.4.2. Среды для выращивания и хранения чистых культур бактерий и для испытаний готовят по ГОСТ 9.048-89  и приложению 2.

Рецептура сред приведена в таблице.

	

		

			
 
			
 
			
 
			
 
			
 
			
 
			
 
			
 
		
		

			

			
Наименование реактивов
			
			

			
Количество для среды
			
		
		

			

			
 
			
			

			
1- Чапека-

			

			Докса с агаром
			
			

			
2 - Чапека-

			

			Докса с агаром без сахарозы
			
			

			
3 - из выще- лоченного агара
			
			

			
4 - МПА
			
			

			
5 - Чапека-

			

			Докса без сахарозы
			
			

			
6 - Чапека-

			

			Докса
			
			

			
7 - БСА
			
		
		

			

			
1. Калий фосфорнокислый однозамещенный, г
			
			

			
0,7
			
			

			
0,7
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
0,7
			
			

			
0,7
			
			

			
-
			
		
		

			

			
2. Калий фосфорнокислый двузамещенный, г
			
			

			
0,3
			
			

			
0,3
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
0,3
			
			

			
0,3
			
			

			
-
			
		
		

			

			
3. Магний сернокислый, г
			
			

			
0,5
			
			

			
0,5
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
0,5
			
			

			
0,5
			
			

			
-
			
		
		

			

			
4. Натрий азотнокислый, г
			
			

			
2,0
			
			

			
2,0
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
2,0
			
			

			
2,0
			
			

			
-
			
		
		

			

			
5. Калий хлористый, г
			
			

			
0,5
			
			

			
0,5
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
0,5
			
			

			
0,5
			
			

			
-
			
		
		

			

			
6. Железо сернокислое, г
			
			

			
0,01
			
			

			
0,01
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
0,01
			
			

			
0,01
			
			

			
-
			
		
		

			

			
7. Сахароза, г
			
			

			
30,0
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
30,0
			
			

			
-
			
		
		

			

			
8. Агар-агар, г
			
			

			
20,0
			
			

			
Выще- лоченный

			

			20,0
			
			

			
Выще- лоченный

			

			20,0
			
			

			
20,0
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
20,0

			
 
			
		
		

			

			
9. Мясо-пептонный бульон, см
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
До 1000
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
500,0
			
		
		

			

			
10. Четырех-

			

			баллинговое неохмеленное пивное сусло (4% сахара), см
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
-
			
			

			
480,0
			
		
		

			

			
11. Вода дистиллированная, см
			
			

			
До 1000
			
			

			
До 1000
			
			

			
До 1000
			
			

			
-
			
			

			
До 1000
			
			

			
До 1000
			
			

			
-
			
		
	

1.4.3. Чистые культуры бактерий пересевают и выращивают, как указано в приложении 1.

1.4.4. Для контроля жизнеспособности бактерий в чашку Петри наливают среду 4 в количестве 20-30 см  и дают ей застыть.

1.4.5. Для размещения образцов смазок среду 3 наливают в чашку Петри в количестве 20-30 см  и дают ей застыть.

1.4.6. Для размещения образцов масел готовят лунки, для чего в застывшей среде 3 стерильным сверлом диаметром 10 мм просверливают пять лунок глубиной около 5 мм.

1.5.1. Суспензию бактерий готовят, как указано в приложении 3.

1.5.2. Для заражения образцов используют водную суспензию смеси бактерий.

1.5.3. Образцы смазок наносят скальпелем в количестве пяти кусочков размером 10х10 мм толщиной 1,5-2,0 мм на поверхность среды в чашку Петри, приготовленную, как указано в п.1.4.5.

1.5.4. Образцы масел наливают в лунки (на 1 мм ниже уровня среды), приготовленные, как указано в п.1.4.6.

1.5.5. Чашка Петри с образцами и контрольные чашки Петри, приготовленные, как указано в пп.1.4.4 и 1.4.5, помещают в бокс. Поверхность образцов и сред заражают водной суспензией смеси бактерий пульверизатором, не допуская слияния капель.

1.5.6. Чашки Петри с зараженными образцами и контрольные чашки (п.1.4.4) помещают в эксикатор, на дно которого налита вода. Эксикатор устанавливают в термостат с температурой (29±2) °С.

1.5.7. Образцы выдерживают в термостате 56 сут.

1.5.8. Через 1-3 сут после начала испытаний осматривают контрольную чашку Петри.

Если на поверхности среды рост бактерий и образование пигмента не наблюдается, культуры бактерий считают нежизнеспособными. Испытания прекращают и повторяют их на новых образцах с вновь приготовленной суспензией бактерий из новой партии бактерий.

1.5.9. Через 28 сут проводят промежуточный осмотр образцов. Испытания образцов, на которых обнаруживают развитие бактерий, прекращают.

 (Измененная редакция, Изм. N 1).

1.5.10. По окончании испытаний чашки Петри извлекают из эксикатора и осматривают образцы.

1.6.1. Образцы масел и смазок осматривают через лупу при 2,5-7-кратном увеличении.

1.6.2. Масла и смазки считают бактериостойкими при отсутствии развития бактерий и пигментации на всех испытанных образцах.