ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ Метод выявления и определения количества энтерококков ГОСТ 28566-90

Срок действия с 01.07.91 до 01.07.96

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Всесоюзным научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности

РАЗРАБОТЧИКИ

В.И.Рогачев, д-р техн. наук; Б.И.Голод, канд. биол. наук; Р.А.Волкова

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 29.05.90 N 1332

3. Срок первой проверки - 1996 г.

Периодичность проверки - 5 лет

4. Стандарт соответствует стандарту СЭВ 6646-89

5. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

	

		

			
 
			
 
		
		

			

			
Обозначение НТД, на который дана ссылка
			
			

			
Номер раздела, пункта
			
		
		

			

			
ГОСТ 4201-79
			
			

			
2
			
		
		

			

			
ГОСТ 10444.1-84
			
			

			
2; 3.1.11; 3.1.12; 3.2.1; 3.2.8; 3.2.9
			
		
		

			

			
ГОСТ 10444.3-85
			
			

			
4.9.1; 4.9.2
			
		
		

			

			
ГОСТ 10929-76
			
			

			
2
			
		
		

			

			
ГОСТ 24104-88
			
			

			
2
			
		
		

			

			
ГОСТ 26668-85
			
			

			
1
			
		
		

			

			
ГОСТ 26669-85
			
			

			
1; 4.1
			
		
		

			

			
ГОСТ 26670-85
			
			

			
3.1.4; 3.1.5; 4.2; 5.4
			
		
	

Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и устанавливает метод выявления и количественного определения энтерококков (Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium, Streptococcus avium, Streptococcus gallinarum).

Метод основан на высеве определенного количества продукта или его разведении в жидкую селективную среду или на поверхность плотной селективной среды, аэробном культивировании посевов при (37±1) °С в течение 24-48 ч, подтверждении принадлежности выросших микроорганизмов к энтерококкам, пересчете их количества на 1,0 г (см ) продукта.

Отбор проб - по ГОСТ 26668 , подготовка к испытанию - по ГОСТ 26669 .

Для проведения испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по ГОСТ 10444.1  со следующими дополнениями:

весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104 *, с наибольшим пределом взвешивания до 200 г и пределом допускаемой погрешности ±2 мг (для взвешивания реактивов);

весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104 , с наибольшим пределом взвешивания до 1 кг и пределом допускаемой погрешности ±10 мг (для взвешивания продукта);

микроскоп световой биологический с увеличением в 900-1000 раз;

стерилизатор горячим воздухом;

термостат с диапазоном рабочих температур от 28 до 55 °С, позволяющий поддерживать заданную температуру с погрешностью ±1 °С;

холодильник бытовой;

водорода перекись по ГОСТ 10929 ;

желчь крупного рогатого скота или сухая желчь;

железо (III) - аммония гидроцитрат;

ферментативный гидролизат казеина;

канамицин сульфат во флаконах по 0,5 г - 500000 ЕД и 1 г - 1000000 ЕД, в ампулах по 5 и 10 см  5% раствора, содержащих 0,25 и 0,5 г препарата;

полимиксин М сульфат во флаконах по 500000 ЕД;

эскулин;

натрия гидрокарбонат (NаНСО ) по ГОСТ 4201 .

3.1. Приготовление растворов

3.1.1. Раствор с объемной долей перекиси водорода 10%:

33,3 см  перекиси водорода с содержанием основного вещества 30% (в случае если перекись водорода имеет другое содержание основного вещества, то делается пересчет) переносят в мерную колбу вместимостью 100 см , доводят объем дистиллированной водой до метки.

3.1.2. Раствор с массовой долей НСl 5%: 11,5 см концентрированной соляной кислоты переносят в мерную колбу вместимостью 100 см , доводят объем дистиллированной водой до метки.

3.1.3. Раствор массовой концентрацией натрия гидроокиси 50 г/дм : 5 г натрия гидроокиси переносят в мерную колбу вместимостью 100 см , растворяют в дистиллированной воде. Раствор доливают до метки.

3.1.4. Раствор 2-, 3-, 5-трифенилтетразолий хлорида (ТТХ) массовой концентрацией 10 г/дм : 1 г ТТХ переносят, смывая дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 100 см , доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор стерилизуют методом мембранной фильтрации по ГОСТ 26670 . В темной плотно закрытой посуде раствор хранят при (4±2) °С не более 3 мес.

3.1.5. Раствор массовой концентрацией теллурита калия 20 г/дм : 2 г теллурита калия переносят, смывая дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 100 см , доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор стерилизуют методом мембранной фильтрации по ГОСТ 26670 .

3.1.6. Спиртовой раствор массовой концентрацией бромтимолового синего 16 г/дм : 1,6 г бромтимолового синего переносят в мерную колбу вместимостью 100 см  и растворяют в этиловом спирте с массовой долей 96%. Раствор доливают этиловым спиртом до метки.

3.1.7. Раствор массовой концентрацией кристаллического фиолетового 0,1 г/дм : 0,01 г кристаллического фиолетового переносят в мерную колбу вместимостью 100 см  и растворяют в дистиллированной воде. Раствор доливают до метки.

3.1.8. Спиртовой раствор массовой концентрацией бромкрезолового пурпурного 16 г/дм : 1,6 г бромкрезолового пурпурного переносят в мерную колбу вместимостью 100 см  и растворяют в этиловом спирте с массовой долей 96%. Раствор доливают этиловым спиртом до метки.

3.1.9. Раствор массовой концентрацией натрия азида 100 г/дм : 10 г натрия азида переносят в мерную колбу вместимостью 100 см , растворяют при легком подогревании в дистиллированной воде и раствор доливают до метки. Раствор готовят под вытяжкой, так как пары натрия азида ядовиты.

3.1.10. Раствор массовой концентрацией канамицина сульфата 50 г/дм  (50000000 ЕД) и 100 г/дм  (100000000 ЕД): во флаконы с 0,5 г или 1 г препарата вносят 10 см  стерильной дистиллированной воды, содержимое флаконов растворяют.

3.1.11. Молоко обезжиренное готовят по ГОСТ 10444.1 .

3.1.12. Растворы для окраски по Граму готовят по ГОСТ 10444.1 .

3.2. Приготовление питательных сред