Toggle Dropdown
ГОСТ Р 53913-2010
(ИСО 16654:2001)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
МИКРОБИОЛОГИЯ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ И КОРМОВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ
Горизонтальный метод обнаружения Escherichia coli О157
Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal method for the detection of Escherichia coli О 157
Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения"
1 ПОДГОТОВЛЕН ОАО "Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации" (ОАО "ВНИИС") на основе аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в пункте 4
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 "Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность"
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 10 ноября 2010 г. N 365-ст
4 Настоящий национальный стандарт является модифицированным по отношению к международному стандарту ИСО 16654:2001* "Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения Escherichia coli О157" (ISO 16654:2001 "Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of Escherichia coli О157") путем изменения содержания отдельных структурных элементов, которые выделены курсивом** или заключены в рамку.
* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым здесь и далее по тексту, можно получить, перейдя по ссылке;
** В бумажном оригинале обозначения и номера стандартов и нормативных документов в разделах "Предисловие", 6, 8 и таблице ДА.1 приложения ДА приводятся обычным шрифтом, остальные по тексту документа выделены курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.
Сведения о соответствии ссылочных национальных стандартов международным стандартам, использованным в качестве ссылочных в указанном международном стандарте, приведены в дополнительном приложении ДА
Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты, корма для животных и устанавливает метод обнаружения бактерий Escherichia coli О157 с обязательным использованием четырех последовательных стадий.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ! Бактерия Escherichia coli О157 может вызывать тяжелую болезнь, опасную для жизни, и имеет низкую дозу инфекционности. Зарегистрировано приобретенное внутрилабораторное заражение.
В целях защиты здоровья персонала лаборатории важно, чтобы этот метод обнаружения выполняли только квалифицированные сотрудники, используя общепринятую лабораторную практику и предпочтительно работая в защищенном производственном помещении. В отношении данного организма необходимо придерживаться требований соответствующих национальных регламентов о здоровье и безопасности на рабочих местах.
Следует соблюдать меры безопасности при утилизации всех инфекционных материалов.
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
| ГОСТ Р ИСО 7218-2008 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям ГОСТ Р 51426-99 (ИСО 6887-83) Микробиология. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Общее руководство по приготовлению разведений для микробиологических исследований ГОСТ Р 51448-99 (ИСО 3100-2-88) Мясо и мясные продукты. Методы подготовки проб для микробиологических исследований ГОСТ Р 53430-2009 Молоко и продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа ГОСТ 26668-85* Продукты пищевые и вкусовые. Методы отбора проб для микробиологических анализов |
| ________________ * На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ Р 54004-2010, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных. |
| ГОСТ 26669-85 Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку. |
В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ Р ИСО 7218, а также следующий термин с соответствующим определением:
3.1 escherichia coli О157 (Е. coli О157): Микроорганизмы, которые образуют типичные колонии на поверхности засеваемой в чашке среды, а также индол, и специфическим образом агглютинируют с антисывороткой к антигену О157.
1 Сорбит-положительные штаммы Е. coli О157 не обнаружены в среде CT-SMAC (5.2).
2 Обнаружены некоторые индол-отрицательные мутации.
* Наименование раздела 4 в бумажном оригинале выделено курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.
Обнаружение Escherichia coli О157 связано с обязательным использованием четырех последовательных стадий в соответствии с приложением А:
- обогащение пробы для анализа, гомогенизированной в модифицированном триптон-соевом бульоне, содержащем новобиоцин (mTSB + N), с инкубацией при температуре (41,5±1) °С в течение 6 ч, а затем еще в течение 12-18 ч;
- сепарация и концентрация микроорганизмов с помощью иммуномагнитных частиц, связанных с антителами к бактерии Е. coli О157;
- выделение путем пересева иммуномагнитных частиц с налипшими бактериями на агаровую среду Мак-Конки, в которую добавляют сорбит и суплемент СТ (цефиксим и теллурит калия) (CT-SMAC), и на выбранную заказчиком вторую селективную агаровую среду для выделения;
- подтверждение идентификации сорбит-негативных колоний на среде CT-SMAC и колоний типичных для Е. coli О157 на второй агаровой среде для выделения в результате образования индола и агглютинации с антисывороткой к Е. coli О157.
Примечание - Определение других характеристик положительных штаммов, например, с помощью патогенных маркеров, возможно после их передачи в соответствующую референтную лабораторию.
5 Питательные среды, реактивы и антисыворотки
Общие правила микробиологических исследований - по ГОСТ Р ИСО 7218.
5.1 Обогатительная среда (модифицированный триптон-соевый бульон с новобиоцином (mTSB + N)
5.1.1 Приготовление среды
Растворяют компоненты или готовую дегидратированную питательную среду в воде, при необходимости подогревают. Устанавливают уровень рН, используя рН-метр (см. 6.6), если необходимо, так, чтобы после стерилизации он соответствовал рН (7,4±0,2) при температуре 25 °С.
Разливают среду в соответствующих количествах в колбы или склянки (6.7).
Стерилизуют в течение 15 мин в автоклаве (см. 6.1) при температуре 121 °С.
5.1.1.1 Раствор новобиоцина
| Новобиоцин | 0,45 г. |
| Дистиллированная вода | 100 см |
НРO
) 
