МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНА С ПОМОЩЬЮ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ГОСТ EN 14152-2013

Дата введения 1 июля 2015 года

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены".

1. Подготовлен Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИКОП Россельхозакадемии).

2. Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт).

3. Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 5 ноября 2013 г. N 61-П).

За принятие проголосовали:

	
		
		
		
	
	

		

			

			
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97    
			
			

			
Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97    
			
			

			
Сокращенное наименование национального органа по стандартизации    
			
		
	
	

		

			

			
Армения    
			
			

			
AM    
			
			

			
Минэкономики Республики Армения    
			
		
		

			

			
Беларусь    
			
			

			
BY    
			
			

			
Госстандарт Республики Беларусь    
			
		
		

			

			
Казахстан    
			
			

			
KZ    
			
			

			
Госстандарт Республики Казахстан    
			
		
		

			

			
Киргизия    
			
			

			
KG    
			
			

			
Кыргызстандарт    
			
		
		

			

			
Молдова    
			
			

			
MD    
			
			

			
Молдова-Стандарт    
			
		
		

			

			
Россия    
			
			

			
RU    
			
			

			
Росстандарт    
			
		
		

			

			
Узбекистан    
			
			

			
UZ    
			
			

			
Узстандарт    
			
		
	

4. Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 6 марта 2014 г. N 100-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 14152-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2015 г.

5. Настоящий стандарт идентичен европейскому региональному стандарту EN 14152:2003 Foodstuffs - Determination of vitamin    by HPLC (Продукты пищевые. Определение витамина    с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии).

Европейский региональный стандарт разработан техническим комитетом CEN/TC 275 "Анализ пищевых продуктов. Горизонтальные методы", секретариатом которого считается DIN.

Перевод с немецкого языка (de).

Официальные экземпляры европейского регионального стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, имеются в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации.

Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам приведены в дополнительном Приложении ДА .

Степень соответствия - идентичная (IDT).

6. Взамен ГОСТ 25999-83 в части раздела 2.

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.

Настоящий стандарт устанавливает метод определения витамина    в пищевых продуктах с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Содержание витамина    определяется как содержание рибофлавина.

Настоящий стандарт содержит отдельные положения из другого нормативного документа, обозначенного приведенной в данном разделе недатированной нормативной ссылкой, предполагающей использование последнего издания документа, включая все изменения.

EN ISO 3696 Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (ISO 3696:1987) (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний) (ISO 3696:1987)).

Метод основан на экстракции рибофлавина из пробы путем кислотного гидролиза, последующем ферментативном дефосфорилировании рибофлавина и его количественном определении с помощью ВЭЖХ с флюориметрическим детектированием [1]  - [8] .

4.1. Общие положения

Для проведения анализа при отсутствии особо оговоренных условий используют только реактивы гарантированной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696 или бидистиллированную воду.

4.2. Реактивы и растворы

4.2.1. Метанол чистотой не менее 99,8%.

4.2.2. Натрий уксуснокислый трехводный чистотой не менее 99%.

4.2.3. Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации   .

4.2.4. Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации   .

4.2.5. Кислота уксусная ледяная чистотой не менее 99,8%.

4.2.6. Кислота уксусная, раствор молярной концентрации   .

4.2.7. Кислота соляная массовой долей 35%.

4.2.8. Кислота соляная, раствор молярной концентрации c(HCl) = 0,1 моль/дм3.

4.2.9. Кислота соляная, раствор молярной концентрации c(HCl) = 0,01 моль/дм3.

4.2.10. Кислота серная, раствор молярной концентрации   .

4.2.11. Натрия гидроокись чистотой не менее 99%.

4.2.12. Натрия гидроокись, раствор молярной концентрации c(NaOH) = 0,5 моль/дм3.

4.2.13. Фосфора пентоксид чистотой не менее 98%.

4.2.14. Дефосфорилирующий фермент, пригодный для гидролиза связанного рибофлавина в пробе.

Примечание. При установлении характеристик прецизионности методики использована така-диастаза  

4.2.15. Подвижные фазы для ВЭЖХ

Варианты подвижных фаз подходящего состава приведены в пояснении к рисунку A.1  Приложения A и в Приложении C . В качестве подвижных фаз используют смеси метанола (см. 4.2.1 ) с водой, фосфатным или ацетатным буферным раствором при объемной доле метанола от 10% до 50%, а также подвижные фазы с добавлением ион-парных реагентов.

4.2.16. Раствор буферный фосфатный (pH = 3,5) молярной концентрации однозамещенного фосфата калия   .

4.2.17. Тетраэтиламмония хлорид чистотой не менее 98%.